免疫細胞化學(xué)是一種利用特異性抗體體檢測抗原, 并且可以在顯微鏡下觀察細胞內(nèi)抗原定位的方法。在IC中經(jīng)常會使用熒光進行檢測。
主要有兩種方法:直接法、間接法。
直接法:是直接在第一抗體上附上熒光標(biāo)記 進行檢測(直接法)。
間接法:是熒光標(biāo)記的第二抗體與第一抗體反應(yīng)并進行檢測。
使用直接法時,通過熒光染色可以更容易的進行多重染色。在這種情況下,我們需要找到熒光間不會相互干擾的組合。
直接法的優(yōu)點: 1.特別是使用熒光標(biāo)記的第一抗體 時,易于進行多重染色。
2.不會出現(xiàn)第二抗體引起的非特異性染色。
3.可以縮短操作時間。
間接法的優(yōu)點:
如果使用的第一抗體來自相同的宿主,那么可以使用相同的標(biāo)記第二抗體,且較為通用。
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