InvivoGen 成立于 1997 年,InvivoGen以先天免疫和細胞培養(yǎng)為基礎(chǔ),提供各種生物學(xué)研究工具,包括疫苗開發(fā)、癌癥研究、調(diào)節(jié)細胞死亡以及炎癥。產(chǎn)品線包括模式識別受體(PRR)、工程細胞系、選擇性抗生素、抗菌試劑、疫苗佐劑、基因和啟動子、小分子抑制劑和抗體,從而滿足在先天免疫和哺乳動物細胞表大方面的研究需求。
InvivoGen 成立于 1997 年,InvivoGen以先天免疫和細胞培養(yǎng)為基礎(chǔ),提供各種生物學(xué)研究工具,包括疫苗開發(fā)、癌癥研究、調(diào)節(jié)細胞死亡以及炎癥。產(chǎn)品線包括模式識別受體(PRR)、工程細胞系、選擇性抗生素、抗菌試劑、疫苗佐劑、基因和啟動子、小分子抑制劑和抗體,從而滿足在先天免疫和哺乳動物細胞表大方面的研究需求。
InvivoGen產(chǎn)品線包括細胞培養(yǎng)、細胞系、PRR配體、抑制劑、抗體和Elisa試劑、疫苗佐劑、蛋白質(zhì)、克隆表達、基因和啟動子等,可用于免疫療法、抗體工程、新冠、接種疫苗、炎癥等方面的研究。
1、模式識別受體( pattern recognition receptor,PRR)
先天免疫是一種進化保守的系統(tǒng),是人體抵御入侵微生物病原體的首道防線。先天免疫細胞表達的模式識別受體 (pattern recognition receptor, PRR) 的激活有助于通過調(diào)節(jié)內(nèi)源性過程(如炎癥和細胞死亡)來維持體內(nèi)平衡。PRR配體根據(jù)其來源分為三大類:病原體相關(guān)分子模式(PAMPs)在微生物中很常見,但在哺乳動物中則不常見;損傷相關(guān)分子模式 (DAMP) 是由宿主組織(例如從垂死細胞)釋放的分子;芳烴受體配體(AhR配體)的范圍從有毒的外源性物質(zhì)(例如二惡英)到來自宿主或微生物群代謝的膳食化合物。在激動劑檢測后,PRR 觸發(fā)細胞內(nèi)信號通路,導(dǎo)致參與免疫反應(yīng)的蛋白質(zhì)的表達。
在哺乳動物中,PRR包括四類:Toll樣受體(Toll-like receptors,TLRs)、RIG-I樣受體(retinoic acid-inducible gene-I(RIG-I)-like receptors,RLRs)、Nod樣受體(nucleotide oligomerization domain(NOD)-like receptors,NLRs)、C型凝集素受體(C-type lectin receptors,CLRs)和一系列細胞內(nèi)DNA傳感器。
1)Toll樣受體
Toll 樣受體 (TLR) 是在哺乳動物中發(fā)現(xiàn)的模式識別受體 (PRR),并且是迄今為止表征較好的受體。它們啟動關(guān)鍵的炎癥反應(yīng),并塑造適應(yīng)性免疫。所有 TLR(人類 10 個,小鼠 11 個)都是 I 型跨膜蛋白,其特征是富含細胞外亮氨酸的結(jié)構(gòu)域和細胞質(zhì)尾巴。它們可識別來自細菌、真菌、寄生蟲和病毒的各種病原體相關(guān)分子模式 (PAMP),包括脂質(zhì)基細菌細胞壁成分(如脂多糖 (LPS) 和脂肽)、微生物蛋白成分(如鞭毛蛋白)和核酸(如單鏈或雙鏈 RNA 和 CpG DNA)。它們還對來自內(nèi)源性細胞和環(huán)境的某些損傷相關(guān)分子模式 (DAMP) 做出反應(yīng)。
InvivoGen 提供TLR報告細胞、TLR配體、抗體、抑制因子、GFP融合基因、配體篩選以及相關(guān)基因用于開展TLR信號通路。
2)RIG-I-Like 受體
RIG-I 樣受體 (RLR) 構(gòu)成一個由三個細胞質(zhì) RNA 解旋酶組成的家族,這些解旋酶對宿主抗病毒反應(yīng)至關(guān)重要。RIG-I 和 MDA-5 檢測雙鏈 RNA (dsRNA),這是 RNA 病毒的復(fù)制中間體,導(dǎo)致感染細胞中產(chǎn)生 I 型干擾素 (IFN)。LGP2 包含一個 RNA 結(jié)合結(jié)構(gòu)域,但缺少 CARD 結(jié)構(gòu)域,因此充當(dāng) RIG-I 和 MDA-5 的負反饋調(diào)節(jié)因子。
InvivoGen 提供RLR報告細胞、RLR配體、抑制因子以及相關(guān)基因用于開展RLR信號通路。
2、細胞培養(yǎng)
InvivoGen 為組織和細胞培養(yǎng)提供支原體檢測、選擇性抗生素、報告基因檢測試劑盒、抗菌劑、細胞轉(zhuǎn)染、轉(zhuǎn)染增強劑以及內(nèi)毒素檢測試劑盒。
1)細胞轉(zhuǎn)染
細胞轉(zhuǎn)染包括將“外來"核酸(如質(zhì)粒或siRNA)引入細胞中,分別過表達或沉默目標(biāo)基因。轉(zhuǎn)染允許在各種細胞環(huán)境中對特定基因的表達進行功能評估。根據(jù)核酸的類型和細胞類型,可以有不同的轉(zhuǎn)染方案,三種主要的轉(zhuǎn)染方法包括化學(xué)(如陽離子脂質(zhì))、物理(如電穿孔)和生物(如病毒轉(zhuǎn)導(dǎo))。新引入的核酸可以瞬時存在,即基因僅在有限的時間內(nèi)表達并且不復(fù)制,也可以穩(wěn)定地存在,即基因整合到受體細胞的基因組中。細胞轉(zhuǎn)染后,基因穩(wěn)定摻入基因組的一個關(guān)鍵因素是使用適當(dāng)?shù)倪x擇性抗生素維持細胞培養(yǎng)中的選擇壓力。
仍然難以轉(zhuǎn)染的細胞,如免疫細胞,通常表達有效的胞質(zhì)傳感器,以檢測外來核酸。因此,需要轉(zhuǎn)染增強子或增強劑來禁用這些防御,有助于促進核酸的表達并大大提高轉(zhuǎn)染成功率。
InvivoGen 提供轉(zhuǎn)染試劑、轉(zhuǎn)染增強劑、選擇性抗生素:
· LyoVec:一種專有的基于陽離子脂質(zhì)的轉(zhuǎn)染試劑,屬于膦酸脂家族。它易于用于多種細胞系的轉(zhuǎn)染,例如人胚胎腎-293(HEK-293)細胞系。
· NATE:一種核酸轉(zhuǎn)染增強劑,可提高瞬時和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染效率。它被設(shè)計用于與推薦用于難以轉(zhuǎn)染的細胞(如人單核細胞和小鼠巨噬細胞)的轉(zhuǎn)染試劑和技術(shù)(分別為 THP-1 和 RAW 264.7)結(jié)合使用。
· 選擇性抗生素:一系列高純度和無內(nèi)毒素的選擇性抗生素,包括玉米蛋白、嘌呤霉素、G418、潮霉素 B Gold 和花霉素。它們可用于哺乳動物和細菌細胞的選擇。
2)抗菌劑
細胞培養(yǎng)中的微生物污染是細胞培養(yǎng)的重要步驟。使用受污染的細胞可能會導(dǎo)致災(zāi)難性的結(jié)果、不可靠的實驗、時間損失和資源浪費。微生物污染物,無論是支原體、細菌還是真菌,都可以使用正確的抗生素制劑來避免和消除。
InvivoGen細胞培養(yǎng)物污染預(yù)防試劑:
· Normocin:預(yù)防支原體、細菌和真菌的抗生素制劑;設(shè)計用于常規(guī)添加到培養(yǎng)的細胞系中
· 原霉素:預(yù)防支原體、細菌和真菌的抗生素制劑;專為常規(guī)添加到原代細胞而設(shè)計
· 真菌:用于防止不同形式真菌(酵母、菌絲和霉菌)的抗真菌溶液;專為常規(guī)添加到細胞培養(yǎng)物中而設(shè)計。
· 瘧原體素預(yù)防:用于預(yù)防廣譜支原體和相關(guān)無壁細菌的抗生素制劑;設(shè)計用于常規(guī)添加到培養(yǎng)的細胞系和原代細胞中。
InvivoGen細胞培養(yǎng)物污染消除試劑:不損傷細胞的情況下可以可靠的、快速的解決污染。
· Normocure:多重耐藥除菌劑
· 真菌素:用于去除不同形式的真菌(酵母菌、菌絲和霉菌)的抗真菌溶液。
· Plasmocure:一種二線抗支原體試劑,推薦用于消除似乎對瘧原體耐藥的支原體。
3、細胞系
InvivoGen提供大量人類和小鼠的細胞系,可用于研究特定基因功能,細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,篩選PRR的激動劑/拮抗劑,控制細胞毒性基因的表達,篩查有毒蛋白抑制劑,測量細胞因子的產(chǎn)生以及驗證抗體功能。此外,還可以通過轉(zhuǎn)錄因子報告細胞(NF-κB、IRF 或 NFAT 通路)、PRR報告細胞(TLR,CLR,CDSs和STING,NLR,RLRs,AhR,ALPK1 / TIFA,炎癥小體)、細胞因子報告細胞、ADCC以及ADCC檢測、免疫檢查點細胞檢測、自噬報告細胞、報告細胞系。
4、抗體
InvivoGen提供針對多種人、小鼠或大鼠蛋白靶標(biāo)的單克隆抗體,包括細胞因子、PRR、免疫檢查點或其他細胞表面標(biāo)志物。同時,InvivoGen還提供特殊的生物發(fā)光 ELISA 試劑盒(LumiKine Xpress 試劑盒),以定量細胞培養(yǎng)上清液、血清和血漿樣品中的細胞因子水平。抗體全部通過重組技術(shù)在CHO細胞產(chǎn)生或者雜交瘤技術(shù)產(chǎn)生,并且經(jīng)過了功能測試,以滿足穩(wěn)定、可重復(fù)和可靠的結(jié)果。
5、克隆和表達載體
InvivoGen為不同的應(yīng)用提供了廣泛的克隆和表達載體:
· 用于抗體生成和同種型轉(zhuǎn)換的 pFUSE-CLIg 和 pFUSE-CHIg 質(zhì)粒
· 用于嚙齒動物轉(zhuǎn)基因的pBROAD和pWHERE質(zhì)粒
· 用于哺乳動物體外和體內(nèi)基因表達的 pVITRO 和 pVIVO 質(zhì)粒
· 用于表達標(biāo)記基因的 pSELECT-Tag 質(zhì)粒
· 用于同時表達兩個基因的pDUO質(zhì)粒
· pBOOST 和 pVAC 質(zhì)粒用于疫苗接種目的
· 用于監(jiān)測PRR激活和細胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的pNiFty誘導(dǎo)報告質(zhì)粒
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