欧美亚洲另类图片与小说-久久久午夜精品男人的天堂-人人妻人人澡人人爽欧美一区双-国产伦精品一区二区三区欧

歡迎光臨北京和一生物科技有限公司網(wǎng)站!
誠信促進(jìn)發(fā)展,實(shí)力鑄就品牌
服務(wù)熱線:

18813176065

產(chǎn)品分類

Product category

技術(shù)文章 / article 您的位置:網(wǎng)站首頁 > 技術(shù)文章 > 比塞勒準(zhǔn)備工作

比塞勒準(zhǔn)備工作

發(fā)布時間: 2024-01-17  點(diǎn)擊次數(shù): 413次

緩沖

制備 Bicelles 的一種有效且方便的方法是使用含有 10mM 磷酸鹽緩沖液(pH 6.6)、0.15 mM N3Na、93% H2O(HPLC 級)、7% D2O (99.9%) 的緩沖溶液。下面,將該溶液簡稱為緩沖液。

比塞勒地層

總共含有 15% w/v(150mg 脂質(zhì)/ml)的 DMPC/DHPC 儲備溶液制備如下:

  1. 將緩沖液添加到凍干脂質(zhì)混合物中。 50 mg 脂質(zhì)混合物,280 mg 緩沖液 200 mg 脂質(zhì)混合物,1130 mg 緩沖液

  2. 讓混合物在室溫(18-220°C)下水合幾個小時。 “q"為 2.8 – 3.0 的脂質(zhì)混合物,水合作用在 2 – 3 小時內(nèi)完成。“q"為 3.25 – 3.5 的脂質(zhì)混合物需要 24 小時才能全部水合。可以通過將任何混合物加熱至 40°C 10 分鐘并循環(huán)至 18°C 兩次,然后短暫渦旋來實(shí)現(xiàn)加速水合(一小時)。

蛋白質(zhì)-Bicelle 混合物

將兩體積的蛋白質(zhì)溶液添加到一體積的 bicelle 溶液中。

二元磷脂顆粒 (Bicelles) 全部改變了核磁共振大分子結(jié)構(gòu)分析

水溶性蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的測定

 

 

 

 

 

Tjandra 和 Bax (1) 最近開發(fā)了一種新的核磁共振 (NMR) 技術(shù),可以在液晶浴中輕輕排列蛋白質(zhì)分子,使研究人員能夠確定相鄰原子之間的每個鍵相對于分子其余部分的取向。通過編譯原子之間的所有此類方向,可以得出蛋白質(zhì)的精確圖譜。在略高于室溫的水溶液中,脂質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)變?yōu)橐壕?(LC) 相,形成圓盤狀顆粒,通常稱為 bicelles (2),直徑為數(shù)百埃,厚度約為 40? 。脂質(zhì)是抗磁性的,因此,bicelles 的方向與其法向正交于磁場。然而,這些樣品的壽命和取向溫度范圍很大程度上取決于樣品成分和實(shí)驗(yàn)條件。Losonczi 和 Prestegard (3) 證明,用少量帶電兩親物摻雜稀釋的 bicelle 溶液可顯著提高穩(wěn)定性和排列程度,并擴(kuò)大這些系統(tǒng)的取向溫度范圍。

基于膠體的 DLVO 理論,提出了 bicelle 聚集對樣品成分依賴性的解釋。Crowell 和 Macdonald (4) 在 25-50°C 的溫度范圍內(nèi)使用固態(tài)磷 (31P) 和氘 (2H) NMR 光譜來研究由 1,2-二肉豆蔻?;?sn-Glycero-3- 組成的雙層膠束 (bicelles)磷酸膽堿 (DMPC) 和 1,2-二己酰基-sn-甘油-3-磷酸膽堿 (DHPC),存在陰離子脂質(zhì) 1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-磷酸甘油 (DMPG) 或陽離子脂質(zhì) 1 時,2-二肉豆蔻?;?3-三甲基丙烷銨 (DMTAP)。31P-NMR譜表明,當(dāng)DMPG/DMPC比例為0至50/50以及DMTAP/DMPC比例為0至40/60時,形成雙胞結(jié)構(gòu),而DHPC的總濃度保持恒定。含有帶電兩親物的雙分子團(tuán)的形成取決于 NaCl 的存在,50 mM NaCl 足以在所研究的所有帶電兩親物濃度下形成雙分子團(tuán),而 150 mM NaCl 可為各種 31PNMR 共振信號提供更好的分辨率。2H-NMR 譜表明,頭基氘化 DMPC 的四極分裂 Dv 作為存在的負(fù)電荷與正電荷數(shù)量的函數(shù)成反比變化,并且 α-碳上的氘核的變化與 α-碳上的氘核的變化在意義上相反。 β-碳。這表明頭基氘代磷脂酰膽堿在 bicelles 中充當(dāng)分子電壓計,其方式與球形囊泡中的作用大致相同。

PH值穩(wěn)定的Bicelles

為了提高 Bicelles 在較寬 pH 范圍內(nèi)的穩(wěn)定性,Ottiger & Bax (5) 證明,二十四烷基磷脂酰膽堿 (14-O-PC) 或二十二烷基磷脂酰膽堿 (12-O-PC) 和二己基磷脂酰膽堿 (6-O-PC) 的混合物水在與先前報道的由 DMPC 和 DHPC 組成的 bicelle 類似的條件下形成溶致液晶相。DMPC 和 DHPC 中存在的羧酸酯鍵被其烷基類似物中的醚鍵取代,這防止了這些化合物的酸或堿催化水解。在 2.3-10.4 pH 范圍內(nèi)測量泛素的 15N-1H 偶極耦合表明,該蛋白質(zhì)在整個范圍內(nèi)保留了與其在 pH 6.5 時的結(jié)構(gòu)非常相似的骨架構(gòu)象。此外,卡瓦涅羅等人。(6) 制備并表征了由 1,2-Di-O-十二烷基-sn-甘油-3-磷酸膽堿 (DIODPC) 和 3-(ChlorAmidoPropyl)-二甲基銨-2-羥基-1-丙烷磺酸鹽組成的新型 Bicelle 系統(tǒng)(查普索)。在 4.3:1 的最佳 DIODPC/CHAPSO 摩爾比下,該介質(zhì)從 pH 6.5 變?yōu)榇判匀∠蛑?pH 1.0。與之前報道的?;字?bicelle 制劑不同,這些 bicelle 在低 pH 下化學(xué)穩(wěn)定,并且能夠誘導(dǎo)蛋白質(zhì)排列,如在 pH 2.1 下測量的來自氧化亞鐵硫桿菌的銹花青素的大殘余偶極耦合所說明的。DIODPC/CHAPSO 系統(tǒng)特別適用于測量需要強(qiáng)酸性條件的大分子的殘余偶極耦合。

脂溶性蛋白結(jié)構(gòu)的測定

斯特魯普等人。(7) 研究了 Myr-d27-GNAAAAKKGSEQES (Cat14) 的氘核磁共振譜,該肽是來自 cAMP 依賴性蛋白激酶 A (PKA) 催化亞基的 N 端 14 個殘基肽,以說明中性和酸性磷脂如何磁性排列bicelles 可用于表征肽與膜結(jié)合的順序和模式。由于 Cat14 是電中性的,因此負(fù)責(zé)結(jié)合的主要相互作用是將肉豆蔻酰基插入雙層的疏水核心。磷脂酰膽堿 DMPC:DHPC bicelles 中包含 25% 磷脂酰絲氨酸 (DMPS) 或磷脂酰甘油 (DMPG) 會導(dǎo)致肽的排序相對于正常 bicelle 適度增加,可能是因?yàn)榱字^基與兩者之間有利的靜電相互作用賴氨酸位于第 7 和第 8 位。通過仔細(xì)調(diào)整脂質(zhì)組成、pH 和離子強(qiáng)度,成功制備了酸性 bicelles。普羅瑟等人。(8) 開發(fā)了一種新的與鐿絡(luò)合的磷脂螯合物 (DMPE-DTPA:Yb3+),它被證明可以很容易地融入模型膜系統(tǒng)中,然后可以在磁場中對齊,使得平均雙層法線位于磁場中。這種所謂的正序近晶相,其脂質(zhì)由低于 1% DMPE-DTPA:Yb3+ 組成,非常適合通過固態(tài) NMR、低角度衍射和需要定向樣品的光譜技術(shù)進(jìn)行膜蛋白結(jié)構(gòu)研究。螯合物 DMPE-DTPA:Yb3+ 與鑭系元素離子牢固結(jié)合,并用于在磁場中定向膜,防止直接的鑭系元素與蛋白質(zhì)相互作用,并顯著減少順磁位移和譜線展寬。正向排列的鑭系元素螯合膜的很大好處在于其在大型固定膜蛋白研究中的應(yīng)用。類似的低自旋鑭系元素螯合物可應(yīng)用于水溶性蛋白質(zhì)的場有序溶液核磁共振研究以及新的磁性排列液晶相的設(shè)計。

 

聯(lián)


国产色悠悠综合在线观看-亚洲av综合av一区-久久久久国产精品三级网-欧美日韩精品一区二区不卡 | 黑人精品视频一区二区三区-在线播放免费av大片-在线免费观看日韩精品-日本av在线观看一区二区三区 | 在线观看91精品国产性-国产中文字幕精品免费-免费日韩毛片在线观看-精品人妻暴躁一区二区三区 | 欧美精品一区二区三区香蕉-国产精品黄色免费网站-蜜桃av乱码人妻一二三区-国产综合亚洲一区激情国产| 日韩在线免费av网站-免费啪视频一区二区三区在线观看-久操热在线视频免费观看-91亚洲国产成人精品性色 | 麻豆视频传媒在线免费看-亚洲性码不卡视频在线-岛国av色片免费在线观看-久久久国产精品视频大全 亚洲中文字幕高清乱码毛片-国产成人午夜福利精品-久久毛片绝黄免费观看-国产亚洲成性色av人片在线观 | 91麻豆免费视频播放-欧美一级黄片免费在线播放-av免费网站不卡观看-日韩女同中文字幕在线 | 日韩精品极品系列在线免费视频-国产中文字幕有码视频-日韩一区二区免费电影-成人夜晚在线观看视频 | 中文字幕久久精品一区二区三区-99国产麻豆精品人人爱-91麻豆精品福利视频-国产精品亚洲一区中文字幕 | 亚洲高清日本一区二区三区-日韩极品精品一区二区三区-亚洲成人av在线一区二区-亚洲精品国产精品粉嫩 | 亚洲天堂男人的天堂在线-亚洲激情欧美日韩在线-国产av剧情精品老熟女-色老头与人妻中文字幕视频 国产四虎视频在线观看-日本一区二区三区暖暖视频免费-91人妻人人澡人人添人人爽-在线日本高清日本免费 | 免费观看一区二区av蜜桃-免费一级特黄久久大片-每日更新日韩中文字幕有码-97视频在线观看午夜 | 欧美日韩你懂的在线观看-国产欧美日韩亚洲一区二区-国产无遮挡裸体免费久久-亚洲国内精品久久久久久 | 亚洲另类午夜中文字幕-日本av手机在线观看-性生交大片免费看看过的-天堂av免费在线观看 | 午夜男女靠比视频免费-欧美激情影院狂野欧美-国语淫秽一区二区三区四区-国产成人av区一区二区三泡芙 | 一本色道亚州综合久久精品-91麻豆国产专区在线观看-一级二级三级国产视频-熟女av天堂免费高清 | 国产好大好硬好爽好湿免费视频-国产精品一区二区精品一区二区-白白色发布在线播放国产-99久久国产精品成人观看 | 国产精品羞羞答答色哟哟-最新麻豆精品在线视频-丰满多毛熟妇的大阴户-精品国产乱子伦一区二区三女 | 91精品国产免费人成网站-91国产小视频在线看-亚洲宅男一区二区三区天堂-成人午夜精品免费观看 | 一区二区在线观看黑人-久久久精品人妻一区二区三区综合-成人内射国产免费观看-四虎在线免费视频观看 | 四虎成人免费永久视频-婷婷激情五月天久久综合-亚洲欧美自拍偷拍丝袜-日韩精品午夜视频一区二区三区 | 日本一区二区三区四区黄色-91在线国产经典观看精品-亚洲一区二区三区免费不卡-av免费在线观看蜜臀 | 欧美高清视频在线高清观看-四虎最新在线播放视频-亚洲中文字幕永久在线全国-亚洲国产av成人精品成人 | 亚洲国产成人不卡高清麻豆-精品国产精品三级在线专区-亚洲欧美国产日韩一区-亚洲高清日本一区二区 | 亚洲手机在线视频亚洲毛-欧美91精品国产自产在线-国产一区二区中文字幕在线视频-国产av91在线播放 | 日本女同免费在线观看-在线视频成人国产自拍-日韩av在线观看大全-后入翘臀剧情片在线看 | 亚洲五月六月丁香缴情久久-国产精品国产三级国产一区-人妻中文字幕一区二区三区四区-精品在线视频尤物女神 | 国产传媒高清视频在线-日韩人妻少妇av在线-日本久久精品高清视频-丰满肥臀大屁股熟妇激情 | 午夜视频在线观看免费国产-国产精品91在线视频-欧美黄片在线免费播放-久久综合九色综合婷婷 | 国产一区二区精品在线播放-亚洲欧美精品伊人久久-亚洲精品日韩在线播放-国产精品色av一区二区三区 | 最近中文字幕国产精品-国产一级片黄片免费观看-日本一区二区三区日韩欧美-亚洲一区电影网站在线观看 | 亚洲av午夜精品久久看一区-日韩欧美91麻豆精东-久久一区二区三区在线观看-国产黄色人人爱人人做 91亚洲综合成人在线-久久精品亚洲av少妇-日本av一区在线视频-9国产精品久久久久麻豆 | 亚洲天堂av免费在线看-操老熟女中国老太自拍-夫妻性生生活免费视频-日韩av有码高清在线 | 亚洲成人av在线播放不卡-亚洲视频一直看一直爽-一区二区三区精品视频日本-精品人妻久久一日二个 男女激情四射午夜福利视频网站-人成午夜免费毛片直接观看-日本女优在线观看一区二区-青草国内精品视频在线观看 | 国产素人一区二区久久-欧美精品不卡在线观看-蜜桃精品一区二区在线播放蜜臀-欧美日韩精品在线一区二区三区 | 国产高清丝袜av综合-精品亚洲一区二区在线-国产丝袜大长腿精品丝袜美女-日本熟女午夜福利视频 | 日本一区二区三区高清视频-九九九热在线观看视频-亚洲综合自拍偷拍人妻丝袜-亚洲精品国产二区三区在线 | 蜜臀精品国产亚洲av尤物-日韩人妻少妇中文字幕-赶碰97在线公开视频-亚洲欧美日韩天堂综合 | 麻豆国产av一区二区精品-久久福利社最新av高清精品-丝袜美腿亚洲综合伊人-亚洲欧洲av一区二区三区 | av资源视频在线观看-最新福利一区二区三区-极品白嫩粉嫩美女国产-久久精品国产亚洲av麻豆软 | 国产亚洲成人精品久久久-亚洲免费av高清在线观看-在线观看国内自拍视频-亚洲国产成人精品综合色 精品国产人成亚洲区中文久久-欧美日韩夫妻性生活视频-亚洲欧美日韩高清专区一-国产精品无套内射后插 |