欧美亚洲另类图片与小说-久久久午夜精品男人的天堂-人人妻人人澡人人爽欧美一区双-国产伦精品一区二区三区欧

歡迎光臨北京和一生物科技有限公司網(wǎng)站!
誠(chéng)信促進(jìn)發(fā)展,實(shí)力鑄就品牌
服務(wù)熱線:

18813176065

產(chǎn)品分類

Product category

技術(shù)文章 / article 您的位置:網(wǎng)站首頁(yè) > 技術(shù)文章 > Cellmax:原代細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)

Cellmax:原代細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)

發(fā)布時(shí)間: 2023-11-06  點(diǎn)擊次數(shù): 486次


 

原代細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用

1、為研究生物體細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝、繁殖提供有力的手段;

2、為傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件;

3、服務(wù)于臨床實(shí)踐,用于藥物篩選等。

  

 

 

01


 

原代細(xì)胞培養(yǎng)之取材

取材作為原代細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的第一部至關(guān)重要,以下幾種取材技術(shù),你都用過(guò)哪些方法呢?

各類組織取材,操作及注意事項(xiàng):

1.皮膚和粘膜

主要取皮片,面積一般2~4平方厘米。

2.內(nèi)臟和實(shí)體瘤

(1)無(wú)菌環(huán)境;

(2)熟悉所需組織的類型和部位;

(3)要避開(kāi)破潰、壞死液化部分,以防污染,盡量去除混雜的結(jié)締組織。

3.血液細(xì)胞

一般多抽取靜脈外周血,或從淋巴組織中(如脾、扁桃體、胸腺、淋巴結(jié)等)分離細(xì)胞,取材時(shí)應(yīng)注意抗凝。

4.骨髓、羊水、胸/腹水細(xì)胞

嚴(yán)格無(wú)菌,注意抗凝,還要盡快分離培養(yǎng),離心后,用無(wú)鈣、鎂PBS洗兩次,再用培養(yǎng)液洗一次后即可培養(yǎng),不宜低溫存放。

 

5.動(dòng)物組織取材——鼠胚組織

(1)用引頸或氣管窒息致死法處死孕期合適的動(dòng)物;

(2)將其浸泡在含有75%酒精的燒杯中,5分鐘后取出動(dòng)物;

(3)在消毒過(guò)的木板上可用無(wú)菌的圖釘或大頭針固定四肢,切開(kāi)皮膚;

(4)用無(wú)菌操作法解剖取胚。

 

6.動(dòng)物組織取材——幼鼠胚腎(或肺)

幼鼠采用上述方法處死消毒后→腹部朝上固定在木板上,先切開(kāi)游離毛皮并拉開(kāi)至兩側(cè)→采用無(wú)菌法打開(kāi)胸腔取肺,或從背部打開(kāi)腹腔取腎。

 

7.雞(鴨)鳥(niǎo)類胚胎組織

(1)取孵化至適當(dāng)胚齡(9~12天)的胚蛋,用照蛋燈在暗處燈檢,若有豐富血管、胚體有運(yùn)動(dòng)的胚蛋,說(shuō)明胚體發(fā)育良好,并用有色筆劃出氣室和胚體位置;

(2)將胚蛋置于蛋架上,先用溫水清洗蛋殼,再用75%酒精棉球擦干;經(jīng)碘酒、75%酒精消毒后,在無(wú)菌條件下采用無(wú)菌法用剪刀或鑷子打開(kāi)氣室,沿氣室邊緣去除蛋殼;

(3)用眼科撕去殼膜,暴露出雞胚;

(4)用彎頭輕挑起胚頭,取出胚胎,放入無(wú)菌平中,解剖取材。

    小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞

  

大鼠血管平滑肌細(xì)胞

 

02

 

原代細(xì)胞培養(yǎng)之分離注意事項(xiàng)

1.組織塊培養(yǎng)

(1)組織塊接種后的前3天,在觀察和移動(dòng)的過(guò)程中,注意不要引起液體的振蕩。要避免經(jīng)常翻動(dòng)和振動(dòng),否則組織塊不易附著于瓶壁上或附著后也會(huì)脫落飄起。

(2)加入的培養(yǎng)液不宜過(guò)多,避免浸泡的組織塊受輕微的波動(dòng)而脫落下來(lái)。

(3)當(dāng)細(xì)胞向外遷徙出來(lái)后要注意記錄并去除漂浮的組織塊和殘留的細(xì)胞,它們產(chǎn)生的有毒物質(zhì)會(huì)影響原代細(xì)胞的生長(zhǎng)。

(4)為促進(jìn)組織塊盡快粘貼在培養(yǎng)瓶上,可以在種植前先將膠原薄層涂在培養(yǎng)瓶底壁上。

  

2.貼壁型原代細(xì)胞

(1)原代培養(yǎng)的分離細(xì)胞在初次接觸體外環(huán)境時(shí),它們之間會(huì)互相影響,在這些細(xì)胞之間能產(chǎn)生一些促生長(zhǎng)的活性物質(zhì),使細(xì)胞彼此互相促進(jìn)存活和生長(zhǎng)。如果接種的細(xì)胞密度過(guò)低,細(xì)胞之間的促生長(zhǎng)作用很小,也很難使細(xì)胞適應(yīng)從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進(jìn)入獨(dú)立生存環(huán)境的變化過(guò)程。如果接種的細(xì)胞密度過(guò)大,會(huì)導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足,代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代。

(2)適當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細(xì)胞密度,給培養(yǎng)的細(xì)胞提供更多的類似于在體內(nèi)時(shí)細(xì)胞之間的相互作用,會(huì)極大提高原代培養(yǎng)的細(xì)胞在體外存活率。待細(xì)胞適應(yīng)體外環(huán)境后進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)再以較低的密度接種和培養(yǎng)。

(3)盡快使接種的細(xì)胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵。可以在接種后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)3h到5h,待細(xì)胞貼壁后,再補(bǔ)足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。

 

3.懸浮型原代細(xì)胞

(1)必須保持細(xì)胞的懸浮狀態(tài)??梢酝ㄟ^(guò)增加培養(yǎng)液的黏度來(lái)幫助細(xì)胞呈懸浮狀態(tài),如給培養(yǎng)液中加入低濃度的透明質(zhì)酸復(fù)合物。在有攪拌裝置的培養(yǎng)器皿內(nèi)加入培養(yǎng)液是,以5ml為限度,否則攪拌時(shí)會(huì)產(chǎn)生氣泡對(duì)細(xì)胞造成傷害。使用這種方式需注意勿使攪拌速度過(guò)快,否則即可使培養(yǎng)液溢出又容易造成污染。如果培養(yǎng)液的量在5ml以下,可以采用旋轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)。給懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞換液時(shí)要注意不要吸出細(xì)胞。

(2)能夠進(jìn)行懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞,其生命力一般都比較旺盛,體外分裂增殖的速度較快,營(yíng)養(yǎng)成分消耗大,換液時(shí)間隔一般較短。

 

 

 aiai

聯(lián)


少妇高潮了好爽在线观看男-麻豆国产传媒国产免费-欧美三级黄片在线播放-亚洲一区域二区域三区域四 | 自拍偷在线精品自拍偷99九色-国产在线日韩欧美91-成人性生交大片免费看r链接-黄色日本黄色日本韩国黄色 | 亚洲女人性开放视频免费-亚洲婷婷精品久久久久-亚洲中字字幕中文乱码-韩日av不卡一区二区三区 | 国产一级r片内射视频播放-中文字幕最新精品资源-久久青青草原精品国产麻豆综合-深夜成人在线免费视频 | 亚洲综合不卡一区二区三区-中文字幕一区二区人妻秘书-国产免费午夜精品理论-中文字幕人妻精品一区二区 | 亚洲精品人妻中文在线-国产成人精品视频三级-麻豆视频黄片在线免费观看-亚洲性色精品一区二区在线 | 国产白浆一区二区在线观看-青草衣衣精品国色天香亚洲av-欧美午夜福利性色视频-成人亚洲一区二区三区在线观看 | 日韩欧美国产亚洲中文-亚洲国产av第一福利网-亚洲欧洲日韩一区二区三区-91精品国产福利线观看久久 | 国产刺激国产精品国产二区-亚洲欧洲日本精品专线-国产精品激情丝袜美女图集-久久精品久久免费懂色 | 亚洲天堂男人的天堂在线-亚洲激情欧美日韩在线-国产av剧情精品老熟女-色老头与人妻中文字幕视频 国产四虎视频在线观看-日本一区二区三区暖暖视频免费-91人妻人人澡人人添人人爽-在线日本高清日本免费 | 欧洲人妻中文字幕在线-白白色永久免费视频播放-精品日韩免费在线视频-风间由美性色一区二区三区 91九色国产成人久久精品-亚洲av无一区二区三区av中文-最新日本加勒比在线视频-激情综合激情五月婷婷 | 蜜桃臀欧美日韩国产精品-最近欧美日韩一区二区-亚洲综合成人一区二区三区-免费五十路熟妇在线视频 | 99精品一区二区成人精品-激情自拍视频在线观看-久久热这里只有精品视频-伊人色综合九久久天天蜜桃 | 亚洲无吗视频在线观看-成人免费在线视频平台-国产午夜视频看看果冻-国产黄色片国产黄色片 | 久久国色夜色精品国产-国产微拍福利一区二区-91超碰青草福利久久尤物-国产精品97在线观看 | 国产免费无套精品视频-日本特色特黄aaa大片免费-日本精品免费一区二区三区-九九热精品视频在线免费 | 91精品在线播放黑丝-在线观看精品国产自拍-av免费在线播放日韩-日韩av在线精品一区二区三区 | 国产激情久久久久成熟影院-成人午夜免费在线视频-亚洲中文字幕成人综合网-色噜噜精品视频在线观看 | 人妻少妇中文字幕久久精品-水蜜桃av一区二区三区在线观看-日韩熟女精品一区二区三区-久久国产综合激情对白 | 蜜臀精品国产亚洲av尤物-日韩人妻少妇中文字幕-赶碰97在线公开视频-亚洲欧美日韩天堂综合 | 激情六月综合激情六月-韩国国产日韩在线观看视频-久久精品国产亚洲av高清色-亚洲熟女乱码一区二区三区 | 最好韩国日本免费高清-蜜桃视频一区二区三区在线观看-国产精品黄色大片在线看-日本高清视频亚洲不卡 | 中文字幕在线成人大片-日本一区二区在线视频播放-精品在线亚洲一区二区三区-在线免费观看播放视频 | 国产免费福利在线激情视频-自拍偷拍福利视频在线-国产亚洲一区二区三区在线播放-欧美国产日本高清不卡免费 | 国产老熟女精品视频大全免费-精品丰满熟女一区二区蜜桃-亚洲自国产拍性生活自拍-中文字幕熟女激情50路 | 日韩免费看在线黄色片-国产精品人妇一区二区三区-国产精品网站一区在线观看-国产精品亚洲一区二区三区不卡 | 日本一区二区三区最新章节-香蕉av久久一区二区三区-久久久国产亚洲精品视频-国产伦精品一区二区三区精品视频 | 国产特黄特色特级黄大真人片-综合激情五月三开心五月-欧美日韩不卡视频合集-成熟的妇人亚洲性视频 | 日韩成av在线免费观看-中文字幕亚洲第一精品-亚洲欧美日韩国产在线-国产精品国精品国产免费 | 能看免费欧美一级黄片-男女视频网站免费精品播放-日本高清在线一区二区三区-熟女少妇免费视频网站观看 | 精品国产高清一区二区广区-午夜少妇激情视频网站-亚洲av日韩精品一区在线-青草亚洲免费在线观看 成人精品一区二区三区不卡-十八禁啪啪啪一区二区三区-后入黑丝美女在线观看-国产熟女啪啪免费视频 | 91精品天堂福利在线观看漫画-亚洲国产精品一区亚洲国产-亚洲国产成人最新精品资源-亚洲国产精品成人综合久 | 亚洲少妇插进去综合网-久草免费在线人妻视频-丰满人妻熟妇乱精品视频-日韩极品精品视频免费在线观看 | 亚洲区一区二区三区四区-精品亚洲国产成人av-国产美腿丝袜诱惑在线观看-美女抠逼视频免费网站 | 精品国产成人亚洲午夜福利-午夜福利一区二区91-亚洲中文字幕女优最新网址-亚洲av成人国产精品 | 精品国产高清一区二区三区-亚洲av日韩av二区三区篇-亚洲精品一区高潮喷水-中文字幕人妻色偷偷久久皮 | 九九热在线视频精品一-国产乱码精品一区二区蜜臀-乱妇乱熟女妇熟女网站视频-国产精品午夜视频在线 | 亚洲中文字幕中出在线-美女口爆吞精在线播放-亚洲欧美清纯唯美另类-国产一区二区三区免费观看不卡 | 99在线精品偷拍视频-国产精品粉嫩在线播放-国产精品极品在线91-中文字幕有码在线亚洲 | 久久一日本道色综合久久大香-欧美午夜福利视频网站-亚洲av午夜精品一区二区-日韩精品区一区二区三区激情 | 国产美女口爆吞精服务-亚洲无人区码一码二码三码-久久精品99国产精品最新-日本少妇激情在线视频 日本人妻中文字幕有码视频-男女啪啪视频免费观看一区-青青草原综合在线视频-极品人妻少妇精品一区二区 |